Localisation cellulaire protéine
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Analyse Cellulaire (SNAP-Tag) - New England Biolabs
Faculté des Sciences Biologie moléculaire Détermination de la localisation cellulaire des protéines par l'utilisation du système à "gène rapporteur" GFP La localisation des protéines dans la cellule Dans les cellules, les protéines se localisent de manière précise au sein des différents compartiments cellulaires. Après leur synthèse, les protéines sont dirigées vers leur localisation finale par des motifs particuliers appelés signaux de localisation.
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Ces signaux correspondent à des morceaux de la protéine dont la séquence varie en fonction de la destination. Lorsque cette protéine est synthétisée dans une cellules eucaryote, par un système à gène rapporteur, elle se répartit uniformément dan le noyau et le cytoplasme. L'observation au microscope à fluorescence d'une cellule qui produit de la GFP permet de mettre en évidence une cellule entièrement fluorescente. Distribution homogène de la GFP dans une cellule de mammifère contenant un système à "gène rapporteur" Localisation de protéines fusionnées à la GFP Le système à gène rapporteur, permet de produire des protéines de fusion dans lesquelles la GFP est associée à une protéine d'intèrêt dont on veut déterminer la localisation cellulaire.
Si la protéine à étudier contient un signal de localisation cellulaire particulier, la protéine de fusion sera dirigée vers le compartiment cellulaire correspondant. L'observation au microscope à fluorescence permet d'identifier la destination finale de la protéine de fusion. Localisation mitochondriale Localisation nucléaire Localisation nucléaire avec accumulation nucléolaire Localisation cytoplasmique périnucléaire.
Documents connexes. La GFP green fluorescent protein. Sateriale, A. Malkusch, S. Cell Biol. Eckhardt M.
Analyse Cellulaire (SNAP-Tag)
Jones S. Methods 8, Klein T. Dellagiacoma C. Banala, S. USA , Flux de travail. Also, photoactivatable fluorescent proteins require high intensity laser light, which may activate undesired cellular pathways e.
Plateforme éducation
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Pep-1 transporte des protéines dans les cellules de mammifères
GFP et autres protéines fluorescentes. Fluorescence can be initiated upon addition of label. Color is genetically encoded and always expressed. Labeling of newly synthesized proteins can be turned off using available blocking reagents e.